Цитата |
---|
Olginoz пишет: Чего только не узнаешь нового. Вот нашла про микроскопию |
«STED, GSD, SPEM (SSIM), RESOLFT, (F)PALM, STORM, PAINT. Поглощение кванта света молекулой сопровождается переходом электрона с основного энергетического уровня (S0) на возбуждённый флуоресцентный уровень (синглетный S1 или триплетный T1). Поглощение также может индуцировать обратимые внутримолекулярные перестройки (например, cis?trans изомеризацию), в результате которых образуется новое состояние молекулы с другими флуоресцентными свойствами. Любой из этих переходов может быть использован для включения/выключения флуорофоров и увеличения разрешения.
Так, микроскопия “снижения стимулированной эмиссии” (stimulated emission depletion (STED) microscopy) основана на одновременном применении двух лучей света – фокусированного луча, возбуждающего флуорофор в центральной зоне (S0?S1), и луча, который в фокусной плоскости имеет форму бублика и тушит флуорофоры вокруг центральной зоны (S1?S0). Таким образом, флуоресценция регистрируется лишь из “дырки бублика”. Разрешение метода определяется законом d = l / (2n * sina * (1 + a * Imax / Is)1/2), где Is – мощность излучения, необходимая для обеспечения преимущественного перехода S1?S0; Imax – мощность излучения тушения. Таким образом, разрешение оказывается регулируемым (зависит от мощности источника) и теоретически бесконечным (Imax / Is ? ?). На практике достигнут порог ~10 нм, что соответствует размерности биологических макромолекул [1].
На аналогичном принципе построена микроскопия насыщенного структурированного освещения (saturated structured illumination microscopy (SSIM) или saturated pattern excitation microscopy (SPEM))…».
Ключевое слово здесь «бублик». Это оно и есть.